FluorCam закрита система флуоресцентного зображення GFP/Chl.

FluorCamЗакрита система GFP/Chl. флуоресцентної візуалізації може обслуговувати ряд молекулярних та клітинних досліджень біології, що застосовуються до зеленого флуоресцентного білка. На закриті системи флуоресцентного візуалізації встановлені повністю керовані програмним забезпеченням і електричні колеса фільтрів, а також ряд наборів фільтрів для виявлення та візуалізації GFP, EGFP, wtGFP, YFP, BFP або інших флуоресцентних білків та флуоресцентів.

Система закритого флуоресцентного візуалізації GFP/Chl. FluorCam також може бути використана для виявлення динамічних змін та просторового розподілу флуоресценту, що випускається рослинами, вимірювання процесів ефекту Каутського, гашення флуоресценту та інших миттєвих (перехідних) флуоресцентних процесів та надання двовимірних флуоресцентних зображень. Спеціально розроблена апаратна конфігурація дозволяє системі автоматично перетворюватися на флуоресцентні білки, флуоресцентні зображення або хлорофлуоресцентні зображення. Система високо інтегрована і здатна здійснювати темну адаптацію зразка.

Сфера застосування:

Флюоресцентне виявлення флуоресцентних білків і флуоресцентів

· Трансфер генів та технології біосенсорів

· Дослідження генетично модифікованих рослин

· Проверка резистентності до різних генотипів

Дослідження рослинно-мікробіологічної взаємодії

Дослідження взаємодії рослин і тварин

· Особливості фотосинтезу рослин та скринінг порушень метаболізму

· Виявлення біологічного та небіологічного примусу

Дослідження спроможності рослин протистояти принудженню або сприйнятливості

· Дослідження нерівномірності пор

· Дослідження метаболічного хаосу

· Оцінка потужності та продуктивності

Особливості:

· Проста робота, вимірювальні зразки регулюються на висоту, інтегровані спеціальні темні адаптаційні коробки для зручності темної адаптації обробки, роботи та ін.

Висока роздільна здатність CCD з роздільною здатністю до 1392 × 1040 пікселів для швидкого та точного захоплення хлорофлуоресценції та GFP

· Можна проводити автоматичні повторювані вимірювання зображення, можна встановити експериментальну програму (протоколи) для автоматичного циклічного вимірювання зображення, дані вимірювання зображення автоматично зберігаються на комп'ютері за датою часу (з часовою маркою)

· З різними загальними експериментальними процедурами (протоколами), такими як індукційний ефект Каутського, аналіз флуоресцентного гашення, вимірювання більш ніж 50 параметрів аналізу

Модуль кольорового зображення TetraCam з максимальною площею зображення 20 х 25 см для аналізу морфології листя або рослин

Типові зразки:

• Листя, стебла, насіння, коріння, ціла рослина

• Здоровлення тканини, маленькі саженці в посуді Петрі

• Фрукти і квіти

• Сині бактерії, зелені водорості, бактерії

• Генетично модифіковані тварини

Технічні параметри:

• Параметри вимірювання: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Більше 50 хлорофлуоресцентних параметрів, кожен параметр може відображати 2D флуоресцентний кольоровий зображення

· Повний протокол автоматичного вимірювання, що дозволяє вільно редагувати програму автоматичного вимірювання

a) Fv/Fm: параметри вимірювання включають Fo, Fm, Fv, QY тощо

b) Індукційний ефект Каутського: Флуоресцентні параметри Fo, Fp, Fv, Ft_Lss, QY, Rfd та інші

c) Флуоресцентний аналіз гашення: Fo, Fm, Fp, Fs, Fv, QY, ΦII, NPQ, Qp, Rfd, qL та інші понад 50 параметрів

d) крива світлової відповіді LC: Fo, Fm, QY, QY_Ln, ETR та інші флуоресцентні параметри

е) PAR абсорбція з NDVI (необхідно)

f) Реоксидантна динаміка (необхідно)

g) Вимірювання статичної флуоресценції, наприклад, GFP

h) Швидкий флуоресцентний динамічний аналіз OJIP (необхідно): Mo (початковий нахил кривої OJIP), фіксована площа OJIP, Sm (вимірювання енергії, необхідної для закриття всіх центрів світлової реакції), QY, PI та інші 26 параметрів

§ Висока роздільна здатність TOMI-2 CCD датчик

а) постійне сканування CCD

b) Максимальна роздільна здатність зображення: 1360 × 1024 пікселів

c) Часова роздільна здатність: до 20 кадрів в секунду при максимальній роздільній здатності зображення

d) роздільна здатність перетворення A/D: 16 бітів (65 536 сірих кольорів)

e) Розмір зображення: 6,45 мкм × 6,45 мкм

f) режим роботи: 1) режим динамічного відео для вимірювання хлорофлуоресцентних параметрів; 2) Режим знімку для вимірювання флуоресцентних білків та флуоресцентних фарбувальних речовин, таких як GFP

g) Режим зв'язку: Gigabit Ethernet

• Пакета джерела світла: 4 великі високоінтенсивні пакетні світлодіодні панелі, кожна панель світлодіодів складається з масиву 8 × 9 світлодіодів, ефективна площа панелі світлодіодів та площа зображення 13 × 13 см

• Вимірювання світла: стандартне червоне світло 617 нм, інші діапазони доступні, тривалість 10 мкс-100 мкс регулюється

• Двохлорне фотохімічне світло: 2 червоне світло (617 нм) + 2 блакитне світло (470 нм), максимальна інтенсивність світла Actinic1 300 мкмоль (фотони) / м2.с, максимальна інтенсивність світла Actinic2 2000 мкмоль (фотони) / м2.с; Максимальне фотохімічне світло може бути модернізовано до 3000 µmol (фотонів) / m².s

• Насичений спалах: максимальна інтенсивність світла 4000 мкмоль (фотони) / м2.с, може бути оновлена до 6000 мкмоль (фотони) / м2.с

• Розмір зображення: 13 х 13 см, для аналізу зображення листя рослини, тканини рослини, водоростей, моху, покриття, цілих рослин або декількох рослин, 96-отворових плат, 384-отворових плат тощо

• Модуль вимірювання GFP: 7-розрядне колесо фільтру та спеціальний фільтр для вимірювання GFP (зеленого флуоресцентного білка)

• Модуль вимірювання поглинання PAR (опційно): далеко червоне світло 740 нм (FAR), двокольорові світлодіоди 660 нм та спеціальні фільтри для вимірювання поглинання PAR та NDVI

• QA в оксидано-динамічному візуалізаційному аналізі (опційно): можливість вимірювання флуоресцентно-динамічного аналізу STF з інтенсивністю світла STF до 120 000 мкмоль (фотонів) / м².s в 100 мкс

• Модуль швидкої флуоресцентної динаміки OJIP (опційно): роздільна здатність часу до 1 мкс, вимірювання та аналіз кривої OJIP з більш ніж двадцятьма пов'язаними параметрами, включаючи: Fo, Fj, Fi, P або Fm, Vj, Vi, Mo, площа, фіксована площа, Sm, Ss, N (кількість обертів скорочення якості), Phi-Po, Psi_o, Phi_Eo, Phi_Do, Phi_pav, ABS/RC (квантовий поток поглинання світла в одиницевому центрі реакції), TRo/RC (квантовий поток поглинання світла в одиницевому центрі реакції), ETo/RC (квантовий поток світла, що передає електрони в одиницевому центрі реакції), DIo/RC (розсіяння енергії в одиницевому центрі реакції), ABS/CS (квантовий поток поглинання світла в одиницевому перерізі зразка), TRo/CSo, RC/CSx (щільність центру реакції), PIABS (індекс «продуктивності» або індекс виживання на основі поглинання світла в одиницевому квантовому потоку), PIcs (індекс «продуктивності» або індекс виживання на основі перерізу)

• Ультрафіолетові світлодіодні джерела світла (необхідно): 365 нм або 385 нм, 1) вимірювання багатокалорної флуоресценції (див. систему багатоспектрального флуоресценційного зображення FluorCam); 2) Вимірювання wtGFP (дикий тип зеленого флуоресцентного білка), DAPI (4',6-диокіл-2-фенілпаран, флуоресцентний фарбувальник)

• Синій світлодіодний джерело світла (необхідно): 470 нм, 1) вимірювання EGFP (посилений зелений флуоресцентний білок); 2) Для дослідження функції пор

• Зелений світлодіодний джерело світла (необхідно): 530 нм, вимірювання YFP (жовтий флуоресцентний білок)

* Вимірювання флуоресцентних білків або флуоресцентних фарбувальних речовин, таких як wtGFP, DAPI, EGFP, YFP, також вимагає вибору відповідного фільтра

• Функціональність програмного забезпечення для аналізу флуоресцентного зображення FluorCam: меню Live, Protocols, Pre-processing, Result

• Протоколи: можна налаштувати час (наприклад, тривалість вимірювання світла, тривалість фотохімічного світла, час вимірювання тощо), інтенсивність світла (наприклад, інтенсивність фотохімічного світла різної якості світла, інтенсивність насиченого блиску, модуляція вимірювання світла тощо), спеціальні мови та скрипти експериментальної програми, а також вільно створювати нові експериментальні програми за допомогою шаблонів майстра в меню Протокол

• Функція автоматичного аналізу вимірювань: можливість налаштування експериментальної програми (протокол) для автоматичного вимірювання циклічного зображення без огляду, налаштування клієнтом кількості повторень та інтервалів, автоматичне зберігання даних вимірювань зображення на комп'ютер за датою часу (з часовою маркою)

  Режим імгненного знімку: режим імгненного знімку дозволяє вільно регулювати інтенсивність світла, час затвору та чутливість для отримання чітко виділених стабільних та миттєвих флуоресцентних зображень зразків рослин

• 

• Попередня обробка зображення: програмне забезпечення автоматично розпізнає кілька зразків рослин або декілька регіонів, а також вручну вибирає регіон інтересу (ROI). Форма ручного вибору може бути квадратним, круглим, будь-яким багатокутником або сектором. Програмне забезпечення для автоматичного вимірювання та аналізу кривих флуоресцентної динаміки кожного зразка та обраного регіону та відповідних параметрів, необмежена кількість зразків або регіонів (> 1000)

• Режим аналізу даних: Режим "перерахунок сигналу" (середнє число) та режим "перерахунок середнього сигналу". Виберіть режим "перерахунок сигналу" у випадку високого співвідношення сигналу та шуму. Виберіть режим "перерахунок середнього сигналу" у випадку низького співвідношення сигналу та шуму, щоб фільтрувати помилки, викликані шумом.

• Результати виходу: флуоресцентні динамічні діаграми з високою роздільною здатністю часу, відео з змінами флуоресцентної динаміки, файли Excel з флуоресцентними параметрами, гістограми, діаграми з різними параметрами зображення, списки флуоресцентних параметрів з різним ROI і т.д.

• Пропускна здатність детектора CCD: 400-1000 нм

· Система подачі світла: статична або динамічна (синусова)

Спектральна відповідь: максимальна квантова ефективність (70%) при 540 нм, перехід на 50% при 400 і 650 нм

Шум читання: нижче 12eRMS, типовий 10e

· Повна потужність пастки: більше 70 000 е (не встановлено)

Bios: прошивка може бути оновлена

· Спосіб зв'язку: Gigabit Ethernet

Розміри: 471 мм (Ш) × 473 мм (Г) × 512 мм (В)

Вага: приблизно 40 кг

Потужність: приблизно 1100 Вт

Напруга живлення: 90-240 В

Типові застосування:

Шанхайський інститут наук про життя використовував FluorCam для вимірювання отриманого зображення GFP. Рослини, які виділяють яскравий колір, є рослинами, які експресують GFP. Чим більше їх кольору є червоним, тим більше GFP вони експресують.

Контракція кнопкового коралу - розширення різних синхронізованих фаз (T1 = 0, T2 = 30, T3 = 60) NDVI та аналіз візуалізації GFP (Miguel, 2014)

Місце походження: Європа